日本小叶常春藤组织培养

日本小叶常春藤为常春藤属中耐寒性较强的品种，植株生长健壮，茎叶浓绿，节间短粗，组织充实，露地越冬性能良好，在笔者所在的扬州地区已经受了－l0摄氏度至－l5摄氏度的低温考验。霜后茎叶略披红晕，为不可多得的冬绿型垂直绿化材料，具有很好的推广应用前景。采用茎节、叶片为外植体，进行组织培养无性系快繁，可有效解决生产应用过程中种源稀少、养殖速率低的矛盾。

材料与方法

采用多年生日本小叶常春藤－年生茎枝的茎节和叶片为外植体。茎节外植体初代培养，材料截成厚0．5公分的小段，叶片外植体切为0.4×0.5公分的方块。培养温度25摄氏度，光照强度2000lx，光照时间每天l2小时。

技术及应用

茎节外植体带菌度较高，但组织发育充实，故以中等强度灭菌剂处理为好，即70％酒精0.5分钟＋0.l％升汞l0分钟，污染率为29.2％。若将0.l％升汞处理时间增加至l5分钟，虽污染率下降至l2.5％，但杀伤率将上升，总体存活率反而会下降，故不宜采用。茎尖外植体因其组织幼嫩，试验中虽使用最低强度5％的次氯酸钠处理l5分钟，褐变死亡率仍高达72.9％。再降低灭菌强度，虽死亡率可以下降，但污染率又上升，在实际操作中较难掌握，故外植体的选用以茎节为宜。

初代培养效应与取材时期密切相关。4月初正值露地栽培植株萌芽期，接种后外植体萌发率最高，达82.4％。5月上旬取用的为当年萌生新梢，材料带菌度低，故接种后污染率最低，为20.l％。7月底进入高温多湿的梅雨季节，外植体带菌度急剧上升，灭菌困难，材料污染率上升，高达89.4％。故日本小叶常春藤的茎节组织培养，外植体取用时间以4月初到5月上旬为宜。#p#分页标题#e#

组织培养中，生长素和细胞激动素的添加，均以低浓度为宜。初代培养基以6－bal.0毫克／升－l＋2.4－d0.l毫克／升－l为好，诱芽率可达90.5％，显著高于其他处理。诱芽生长量达l.2公分，呈极显著变异水平。继代增殖培养，在6－bal毫克／升－l水平，生长素配比量仍以低水平为宜，生长素类别以naa优于2.4－d，试验范围内以ms＋6－bal.0毫克／升－l＋naa0.0l毫克／升－l的增殖系数为高。

叶片愈伤组织诱导培养，接种3天叶片卷曲增厚。这不仅和6－ba／naa相对比值有关（l∶3＞l∶2＞l∶l），且和其绝对用量水平紧密相关，综合试验结果以ms＋6－bal.0毫克／升－l＋naa3.0毫克／升－l时最高，达82.4％。

茎节培养过程中，经多次继代养殖，发现有皱叶性状变异的个体出现。同样的性状变异，在其他常春藤物种中有选育成新品种的应用范例，若能将变异性状加以分离、固定，并扩大养殖，在提高其观赏特性上具良好的应用前景，不失为－条途径。若能将组织培养技术和辐照诱变等育种手段相结合，则对常春藤育种研究有很大帮助。推荐阅读：红花继朩的组培技术根雕—狂飙中华奇石神仙舞曲